硝酸纤维素NC膜的优点和用途
发布时间:2017-03-28 16:50:48作者:轩仪来源:http:///点击:47599
上海轩仪仪器设备有限公司现货供应日本ADVANTEC的纯硝酸纤维度NC膜,硝酸纤维素NC膜的优点和用途分别是什么?今天让我们来了解一下。
硝酸纤维素膜也叫NC膜,是蛋白印迹*广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。
硝酸纤维素NC膜的使用很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在去离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;硝酸纤维素 NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。转移到硝酸纤维素NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途,因为经不起多次“折磨”。
选择硝纤NC膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话*好选择0.1um的膜。另外还要注意选择纯的NC膜。混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。
另外,由于NC膜上结合的蛋白会因为一些去污剂而被代替,因此在封闭时*好使用较温和的Tween20,而且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果*好)。一般而言,NC膜越纯,其蛋白结合能力就越高,所以要增加WB的灵敏度和分辨率,提高所使用膜的纯度是个可以考虑的选择。如果NC膜搀杂一些醋化纤维素,会影响蛋白质结合。ADVANTEC生产的硝酸纤维素滤膜由于是纯NC膜,比较脆,需要小心操作。
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